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首先,条件淘汰赛有什么区别?

文章来源:365bet体育在线手机版时间:2019-11-30
传统的条件KO方法是将lox站点放在要删除的片段的任一侧(称为Criticalregion,依此类推)。为了检测,我们在一个lox位点FRT位点旁边放置一个新霉素标记物(即FRT?Neo?FRT?Loxp)。
将这些小鼠称为flox小鼠,并将flox小鼠与Flpe菌株(识别重组酶的FRT位点)配对以除去Neo标签,得到没有Neo标记的flox小鼠。
用Cre表达系统交配flox小鼠去除两个loxp位点之间的部分,其包含关键区域和新霉素标记。
Cre菌株是在各种组织和细胞中表达Cre重组酶的转基因小鼠或敲入蛋白。将flox小鼠与它们配对以实现针对组织和细胞的特异性敲除,即条件性敲除。
KO优先和条件性KO之间的主要区别在于顶部的neimycin标记位置处的组分更复杂,LacZ和新霉素的组合和剪接受体位点。
因此,新霉素用作检测标记,其功能与上述条件性KO一致。LacZ可以用作目的基因启动子中的报告基因,以与目的基因一起表达,并且可以方便地发现目的基因的表达。
类似地,与Flpe表达系统配对可以去除lacZ-neo标记并将其转换为正常的条件性KO flox小鼠。
在与Flpe菌株交配之前,FLO第一个flox小鼠模型与flox小鼠的KO条件模型不同,并且条件性KO的flox小鼠具有正常表型,但KOfirst具有KO表型(敲除)是的。
与Flpe菌株交配后,flox小鼠的两种策略是相同的并且都是正常的。
通常,具有新霉素的条件性KO小鼠可以直接与crealine配对以获得条件性敲除小鼠。但是,KOfirst需要首先与Flpe配对,然后与Cre合作,这样我们很快就会拥有更多代。